高分辨率熔解曲线法鉴定希腊PDO菲达奶酪真伪

一句话概括

本文开发了一种基于线粒体DNA区域的高分辨率熔解（HRM）闭管检测法，用于鉴别牛、绵羊、山羊乳源并对希腊PDO菲达（Feta）奶酪进行真伪认证及羊乳/山羊乳掺混比例的定量。

PDO菲达奶酪规定必须以绵羊乳为主、山羊乳占比不超过30%，牛乳掺入是常见的商业造假手段，需要灵敏的检测方法（p.1）。
用实时PCR结合Syto9染料检测D-loop基因区域，对牛乳掺假的检测限达到0.1%，优于欧盟参考方法要求的0.5%（p.2-3）。
纯绵羊样品熔解曲线的解链温度（Tm）约78.5℃，纯山羊样品约80.6℃，混合样品出现双峰，据此可建立标准曲线定量羊乳配比（R²=0.945）（p.4）。
以70%绵羊乳:30%山羊乳的标准菲达奶酪熔解谱作为判定阈值，检测的8个市售菲达样品中仅1个（Feta 7）超出阈值，提示其山羊乳占比可能超过法定上限（p.5）。
相较传统免疫学、电泳及色谱法，HRM法操作简便、成本低、无需测序即可完成物种鉴别和定量掺假分析，适合作为PDO乳制品常规真实性检测手段（p.1, p.5）。

中文	原文
高分辨率熔解分析	High Resolution Melting (HRM) analysis
解链温度	melting temperature (Tm)
受保护的原产地名称	Protected Designation of Origin (PDO)
线粒体D环区	D-loop region